问题七、为什么要血清热灭活。
加热可以灭活补体系统。启动的补体参与溶解细胞事件,刺激平滑肌收缩,细胞和血小板释放组胺,启动淋巴细胞和巨噬细胞活化。在免疫学研究、培养ES 细胞、昆虫细胞和平滑肌细胞时,推荐使用热灭活血清。
问题八、有必要对血清都进行热灭活吗。
实验显示,热灭活血清对大多数的细胞而言是不需要的。经此处理过的血清对细胞的生长只有微小的促进,或完全没有任何作用,甚至通常因为高温处理影响了血清的质量,而造成细胞生长速率的降低。而经过热处理的血清,沉淀物会显著地增多,这些沉淀物在倒置显微镜下观察,像是“小黑点”,常常会让研究者误以为是血清遭受污染,而把血清放在37℃环境中,又会使此沉淀物更增多,使研究者误认为是微生物的分裂扩增。 因此我们建议您,若非必须,您可以不需要做热灭活处理这一步。如此一来,不但节省您宝贵的时间,更确保血清的质量!
问题九、如何正确进行血清灭活。
热灭活时请将血清置于 56℃水浴30 分钟。为尽量减少热灭活对血清品质的影响,一次灭活的血清体积不宜过大。最好准备同样的容器装相等体积的水(与血清相同温度),灭活时将装有血清和水的容器同时放入56℃水浴, 在装水的容器中放置温度计,加热过程中不时轻轻旋转混匀血清,当温度计显示达到56℃左右,开始计时。