问题四、血清解冻后发现有絮状物出现,该如何处理?
血清中絮状物的出现有许多种原因,最普遍的原因是由于血清中脂蛋白的变性所造成;血纤维蛋白(形成凝血的蛋白之一)在血清解冻后,也会存在于血清中,也是造成絮状物物的主要原因之一。这些絮状物的产生不会影响血清本身的质量。 若您欲去除这些絮状沉淀物,可以将血清分装至无菌离心管内,以400g离心力短暂离心,再将离心后的上清液加入培养基内一起过滤。我们不建议您直接过滤血清以去除这些絮状物,因为它可能会阻塞过滤膜。
问题五、为什么储存在冰箱中的胎牛血清会出现沉淀?
在2-8℃储存时,胎牛血清中的各种蛋白和脂蛋白(如冷凝集素、纤维蛋白原、玻粘连蛋白等)可能聚集而形成沉淀或可见的混浊物。这些沉淀的产生不会影响血清的质量。推荐在-20℃储存胎牛血清,避免反复冻融。
问题六、如何避免沉淀物的产生?
我们建议您在使用血清的时候,注意下列的操作: ①解冻血清时,请按照所建议的逐步解冻法(-20℃至4℃至室温),若血清解冻时温度
变化太大(如-20℃至37℃),实验显示非常容易产生沉淀物。 ②解冻血清时,请随时轻轻地将之摇晃均匀,使温度及成分均一,减少沉淀的发生。 ③请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久,血清会变得混浊。④不稳定的成分也会因此受到损害,而影响血清的质量。 ⑤血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以无须做此步骤。 ⑥若必须做血清的热灭活,请遵守56℃、30 分钟的原则,并且随时摇晃均匀。温度过高,时间过久或摇晃不均匀,都会造成沉淀物的增多。